細(xì)胞基本操作
● 細(xì)胞復(fù)蘇
● 細(xì)胞密度判斷及換液
● 為什么需要細(xì)胞傳代
● 細(xì)胞凍存注意事項
● 常見細(xì)胞污染及處理
細(xì)胞復(fù)蘇
準(zhǔn)備工作——操作臺消毒潔凈,預(yù)熱培養(yǎng)基,準(zhǔn)備培養(yǎng)瓶及離心管
解凍細(xì)胞及離心——從液氮/-80冰箱取出細(xì)胞,迅速轉(zhuǎn)移到37°C水浴鍋中,浸沒深度應(yīng)超過凍存物 ,并持續(xù)搖晃直至無凍塊。酒精棉球擦拭凍存管后移入操作臺。向凍存管中加入1ml預(yù)熱培養(yǎng)基,輕輕吹打,轉(zhuǎn)移所有液體至離心管。常溫800g離心5分鐘
接種及培養(yǎng)——棄去上清,使用預(yù)熱的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞至培養(yǎng)瓶,立即放入培養(yǎng)箱。