SAM 510:SAM甲基轉(zhuǎn)移酶檢測(cè)是一種連續(xù)動(dòng)力學(xué)酶偶聯(lián)檢測(cè)，可連續(xù)監(jiān)測(cè)純化的SAM依賴性甲基轉(zhuǎn)移酶，無(wú)需使用放射性標(biāo)記或終點(diǎn)測(cè)量。這是一種靈敏的蛋白質(zhì)甲基化轉(zhuǎn)移酶的酶偶聯(lián)分析。

關(guān)鍵生物分子和蛋白質(zhì)的甲基化在許多生物系統(tǒng)中起著重要作用，包括信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、生物合成、蛋白質(zhì)修復(fù)、基因沉默和染色質(zhì)調(diào)節(jié)。

S-腺苷甲硫氨酸（SAM）依賴性甲基轉(zhuǎn)移酶使用SAM，這是僅次于ATP的第二種常用的酶輔因子。SAM，也稱為AdoMet，充當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)和DNA修飾所需的甲基基團(tuán)的供體。SAM水平異常與許多異常有關(guān)，包括阿爾茨海默氏癥、抑郁癥、帕金森氏癥、多發(fā)性硬化癥、肝衰竭和癌癥。

圖1概述了檢測(cè)的總體方案。基本上，從SAM中去除甲基會(huì)產(chǎn)生S-腺苷高半胱氨酸，其通過(guò)所包含的腺苷高半胱氨酸核苷酶快速轉(zhuǎn)化為S-核糖高半胱氨酸和腺嘌呤。這種快速轉(zhuǎn)化防止了腺苷高半胱氨酸的積累及其對(duì)甲基化反應(yīng)的反饋抑制。最后，腺嘌呤通過(guò)腺嘌呤脫氨酶轉(zhuǎn)化為次黃嘌呤，次黃嘌呤又轉(zhuǎn)化為尿酸鹽和過(guò)氧化氫。過(guò)氧化氫的生成速率通過(guò)在510納米處吸光度的增加用比色分析來(lái)測(cè)量。

由于腺苷高半胱氨酸核苷酶的特異性，該測(cè)定可適用于任何純化的SAM依賴性甲基轉(zhuǎn)移酶或產(chǎn)生5-腺苷高半胱氨酸或5’-甲硫腺苷的純化酶。

該試劑盒配有足夠用于100 x 115 l微孔檢測(cè)的試劑。

A 熒光SAM甲基轉(zhuǎn)移酶分析也是可用的。

特征

• 純化甲基轉(zhuǎn)移酶的動(dòng)力學(xué)分析或篩選甲基化抑制劑。
• 用于動(dòng)力學(xué)研究的連續(xù)酶偶聯(lián)分析。
• 比色、非放射性分析。
• 提供所有試劑，包括陽(yáng)性質(zhì)控品。
• 適用于產(chǎn)生S-腺苷高半胱氨酸或5’-甲硫腺苷的酶。

應(yīng)用程序

• 用于蛋白質(zhì)SAM甲基轉(zhuǎn)移酶的動(dòng)力學(xué)分析。
• 甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑篩選的理想選擇。