簡(jiǎn)要描述:mirus Trans IT-VirusGEN® 轉(zhuǎn)染試劑旨在增強(qiáng)包裝和轉(zhuǎn)移質(zhì)粒向貼壁和懸浮 HEK 293 細(xì)胞類(lèi)型的遞送,以增加重組腺相關(guān)病毒 (AAV) 和慢病毒的產(chǎn)量。
詳細(xì)介紹
品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 一個(gè)月 |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
mirus Trans IT-VirusGEN® 轉(zhuǎn)染試劑
Trans IT-VirusGEN® 轉(zhuǎn)染試劑 旨在增強(qiáng)包裝和轉(zhuǎn)移質(zhì)粒向貼壁和懸浮 HEK 293 細(xì)胞類(lèi)型的遞送,以增加重組腺相關(guān)病毒 (AAV) 和慢病毒的產(chǎn)量。
Trans IT-VirusGEN® 轉(zhuǎn)染試劑的主要優(yōu)點(diǎn) 包括:
性能 – 高效 DNA 遞送,用于生產(chǎn)高滴度病毒載體
可擴(kuò)展性 – 從 < 1 ml 到大規(guī)模培養(yǎng)的高效生產(chǎn)
靈活性 ——兼容不同的重組病毒和細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)
無(wú)動(dòng)物源性 – 全合成轉(zhuǎn)染試劑配方
Trans IT-VirusGEN® 是學(xué)術(shù)研究和生物制藥發(fā)現(xiàn)的理想選擇。使用 VirusGEN® AAV 轉(zhuǎn)染試劑盒和 VirusGEN® LV 轉(zhuǎn)染試劑盒中包含的優(yōu)化增強(qiáng)劑可以進(jìn)一步提高滴度。
Trans IT-VirusGEN® 在懸浮和貼壁 AAV 細(xì)胞培養(yǎng)中優(yōu)于競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手試劑。 在 FreeStyle™ F17 培養(yǎng)基 (A) 中生長(zhǎng)的懸浮 FreeStyle™ 293-F 細(xì)胞或貼壁 293T/17 細(xì)胞 (B) 用 pAAV-hrGFP、pAAV-RC 和 pAAV-Helper(比例為 1:1:1,1.5 µg)轉(zhuǎn)染/ml,Agilent Technologies),使用以下試劑: Trans IT-VirusGEN®(2:1,體積:重量)、競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品 B4 (3:1)、競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品 B5 (3:3:1) 或 25 kDa PEI (4: 1、綜合科學(xué))。使用收獲的病毒轉(zhuǎn)導(dǎo) HT1080 細(xì)胞,并在轉(zhuǎn)導(dǎo)后 48 小時(shí)使用番石榴 easyCyte™ 5HT 流式細(xì)胞儀測(cè)量 GFP 表達(dá)。功能效價(jià)是通過(guò) GFP 陽(yáng)性細(xì)胞少于 20% 的病毒稀釋液來(lái)測(cè)量的。誤差線代表一式三份孔的標(biāo)準(zhǔn)偏差。
Trans IT-VirusGEN® 在懸浮和貼壁慢病毒細(xì)胞培養(yǎng)中優(yōu)于競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手試劑。 在 FreeStyle™ F17 培養(yǎng)基 (A) 中生長(zhǎng)的懸浮 FreeStyle™ 293-F 細(xì)胞或貼壁 293T/17 細(xì)胞 (B) 用 pLKO.1-puro-CMV-TurboGFP™ 轉(zhuǎn)移載體和由 MISSION® 提供支持的慢病毒包裝混合物轉(zhuǎn)染( 1:1 比例,1 µg/ml),使用以下試劑: Trans IT-VirusGEN®(3:1,體積:重量)、競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品 B4(2:1 (A) 或 3:1 (B))、競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品 B5 (2:2:1 (A) 或 3:3:1 (B))或 25 kDa PEI(4:1,Polysciences)。收獲上清液,過(guò)濾(0.45 µm),并使用 293T/17 細(xì)胞進(jìn)行滴定。慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)在 8 µg/ml Transduce存在下進(jìn)行 轉(zhuǎn)導(dǎo)后 72 小時(shí)使用番石榴 easyCyte™ 5HT 流式細(xì)胞儀測(cè)量 IT™ 和 GFP 表達(dá)。功能效價(jià)是通過(guò) GFP 陽(yáng)性細(xì)胞少于 20% 的病毒稀釋液來(lái)測(cè)量的。誤差線代表一式三份孔的標(biāo)準(zhǔn)偏差。
Trans IT-VirusGEN® 實(shí)現(xiàn)廣泛的可擴(kuò)展性 (AAV)。 使用 pAAV-hrGFP、pAAV-RC 和 pAAV-Helper(比例為 1:1:1,總計(jì) 1.5)轉(zhuǎn)染在 FreeStyle™ F17 培養(yǎng)基 (A) 中生長(zhǎng)的懸浮 FreeStyle™ 293-F 細(xì)胞或貼壁 293T/17 細(xì)胞 (B) µg/ml,Agilent Technologies),使用 Trans IT-VirusGEN® 轉(zhuǎn)染試劑(試劑與 DNA 比例為 2:1(體積:重量),Mirus)在一定體積的培養(yǎng)皿中。收獲的病毒用于轉(zhuǎn)導(dǎo) HT1080 細(xì)胞,并在轉(zhuǎn)導(dǎo)后 48 小時(shí)通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)測(cè)量 GFP 表達(dá)。功能效價(jià)是通過(guò) GFP 陽(yáng)性細(xì)胞少于 20% 的病毒稀釋液來(lái)測(cè)量的。誤差線代表一式三份的孔、燒瓶或培養(yǎng)皿的標(biāo)準(zhǔn)偏差。
與 PEI 相比, Trans IT-VirusGEN®具有更高的慢病毒生成轉(zhuǎn)染效率 。 使用Trans IT-VirusGEN® 轉(zhuǎn)染試劑(試劑與 DNA 比例為 3:1;體積:重量),用慢病毒包裝質(zhì)粒和 (a) 對(duì)照 RFP 轉(zhuǎn)移質(zhì)?;?(b) 靶向 SPdCas9-RFP 轉(zhuǎn)移質(zhì)粒轉(zhuǎn)染 HEK293T/ 17 細(xì)胞) 或 25 kDa 線性 PEI(試劑與 DNA 比例為 3:1;重量:重量)。轉(zhuǎn)染后 17-22 小時(shí)拍攝明場(chǎng)和 RFP 圖像。
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