incell  培養(yǎng)基

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EZ-CPZ™

一般說明
EZ-CPZ™ 是一種優(yōu)質(zhì)的 GMP 制造培養(yǎng)基，用于冷凍保存用于臨床或特殊研究應(yīng)用的人體細(xì)胞。它是一種專有的、化學(xué)成分明確的臨床級成分、冷凍保護劑和二甲亞砜的配方。EZ-CPZ™ 采用方便、即用的配方包裝，并與濃縮細(xì)胞懸液 1:1 混合，因此不需要離心。

配方和包裝
EZ-CPZ™ 不含未定義或動物來源的成分，包括血液制品和蛋白質(zhì)。EZ-CPZ™ 在通過各種途徑注射到動物體內(nèi)時未表現(xiàn)出毒性。儲存在 EZ-CPZ™ 中并重新激活的人類和動物細(xì)胞保留了高活力以及出色的生長和分化潛力。EZ-CPZ™ 已開發(fā)用于在無血清培養(yǎng)基（如 INCELL 的 ACE™ 培養(yǎng)基）中生長的細(xì)胞，其中冷凍保存方法和成分需要滿足“無動物成分"標(biāo)準(zhǔn)。當(dāng)用于 1:1 混合方案時，二甲基亞砜 (DMSO) 的最終濃度為 5% v/v。

用途和方法
EZ-CPZ™ 是一種高性能培養(yǎng)基，已成功用于多種類型的人和動物新鮮分離的組織和細(xì)胞、體外培養(yǎng)的細(xì)胞和已建立的細(xì)胞系。這些已成功冷凍保存在 EZ-CPZ™ 培養(yǎng)基中。儲存的細(xì)胞已成功復(fù)活，具有高恢復(fù)性、活力、生長和分化能力。

臨床標(biāo)本和早期傳代培養(yǎng)細(xì)胞
這包括從多個人體實體組織、血細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞中新鮮分離的細(xì)胞。從類似的動物組織中可以獲得類似的結(jié)果。從這些來源開始培養(yǎng)的細(xì)胞很少或沒有傳代培養(yǎng)物，然后儲存在 EZ-CPZ™ 中，在臺盼藍(lán)染料排除測定中具有從低 75% 到 90% 或更高的恢復(fù)活力范圍。將貼壁或懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞與 EZ-CPZ™ 以 1 至 10 x106 個細(xì)胞/mL（取決于細(xì)胞類型）或其他不超過冷凍保存培養(yǎng)基總體積 20% 的細(xì)胞密度以 1:1 的比例輕輕混合。添加血清或血漿是可選的，如果目標(biāo)是維持確定的細(xì)胞系統(tǒng)，則添加血清或血漿是有害的。腫瘤細(xì)胞或血細(xì)胞新鮮收集在含有或不含有自體（或異種）血漿或含抗凝劑的血清的培養(yǎng)基中，也可以與 EZ-CPZ™ 1:1 混合。或者，EZ-CPZ™ 可直接用作標(biāo)準(zhǔn)的 10% (v/v) DMSO 冷凍保存培養(yǎng)基，以重懸細(xì)胞濃縮液或細(xì)胞沉淀。冷凍管或袋子被放置在一個受控速率的冷凍容器或“先生"中。在 -80°C 下用異丙醇冷凍至少 12 小時，以每分鐘約 1 度的速度冷卻。然后將它們轉(zhuǎn)移到 –135°C 冰箱或液氮冰箱中。將冷凍管置于 37°C 水浴中約 1 分鐘，直至大部分培養(yǎng)基解凍，即可快速回收冷凍細(xì)胞。立即將細(xì)胞置于預(yù)熱的細(xì)胞培養(yǎng)基中。此時細(xì)胞極其脆弱，必須輕拿輕放。大多數(shù)細(xì)胞在更換培養(yǎng)基前生長數(shù)小時或過夜后從冷凍保存中恢復(fù)。雖然通常沒有必要，但將一些細(xì)胞離心以去除冷凍保護劑培養(yǎng)基，然后輕輕地重新懸浮在生長培養(yǎng)基中。

細(xì)胞系
INCELL 專有的 E10（抗 HHV-8）雜交瘤、NCM460D™、NCM356D™、IBHK-4 和其他標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞系已在 EZ-CPZ™ 中成功并反復(fù)冷凍。它也被用于冷凍保存來自許多物種和細(xì)胞類型的大量標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞系，并在他們推薦的培養(yǎng)基中生長。一系列示例包括 CHO、BHK、COS、293、3T3、U937、HT29 和 HL60。

制造
EZ-CPZ™ 是在 ISO 7 級潔凈室和 ISO 5 級生物安全柜中使用 cGMP 標(biāo)準(zhǔn)制造的。所有組件都經(jīng)過內(nèi)毒素測試，并通過 0.22µm 過濾器過濾，并檢查無菌（細(xì)菌、真菌和支原體）。每批 EZ-CPZ™ 都經(jīng)過質(zhì)量規(guī)格和驗收標(biāo)準(zhǔn)測試。它還針對細(xì)胞活力和生長效果進行了性能測試。分析證書可確保每批產(chǎn)品均符合驗收規(guī)范。

• 規(guī)格
  pH
  滲透壓*
  內(nèi)毒素 無菌
  視覺
  清晰度
  微粒
  功能檢測

• 驗收標(biāo)準(zhǔn)
  6.8-7.5
  1600-2100
  <0.5 EU/mL
  無微生物生長
  清澈無色
  無明顯顆粒物
  E10 雜交瘤細(xì)胞的活力 ≥ 起始活力的 70%

EZ-CPZ™ 的儲存
EZ-CPZ™ 必須在 2° 至 8°C 下儲存在避光袋或其他合適的容器中。不要凍結(jié)。

儲存在 2°C – 8°C。對光敏感。

上海牧榮生物科技有限公司

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