中文字幕国产第一页_中文字幕精品第一区二区三区_中文字幕第一页在线观看_中文字幕成第一页在线永久_中文字幕被公侵犯的漂亮人妻_中文字幕av无码不卡免费_国产裸拍裸体女网站链接在线观看

您好!歡迎訪問上海牧榮生物科技有限公司網(wǎng)站!
咨詢熱線

17621170138

當(dāng)前位置:首頁 > 技術(shù)文章 > hellobio ICC 問題故障排除

hellobio ICC 問題故障排除

更新時(shí)間:2024-02-26      點(diǎn)擊次數(shù):395

免疫細(xì)胞化學(xué)是一個(gè)漫長的多步驟過程,需要考慮許多不同的因素。在某些時(shí)候,不可避免地會出現(xiàn)問題或不是最佳狀態(tài)。以下匯總了一些可能導(dǎo)致免疫細(xì)胞化學(xué)不起作用的最常見陷阱。

問題 潛在原因 建議的解決方案
染色弱或缺失細(xì)胞已從蓋玻片上脫落

- 洗滌時(shí)更加輕柔或減少洗滌次數(shù)

細(xì)胞通透性較差 

- 嘗試增加 Triton X-100 的濃度

細(xì)胞干涸 - 確保在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中細(xì)胞始終被過量的液體覆蓋
細(xì)胞過度固定 

- 減少細(xì)胞與固定劑一起孵育的時(shí)間

一抗太少 

- 增加一抗?jié)舛?/span>
- 增加孵育時(shí)間
- 考慮采用三步檢測系統(tǒng)(例如基于生物素-鏈霉親和素)

光照 

- 確保應(yīng)用二抗后樣品永遠(yuǎn)不會暴露在光線下
- 成像時(shí)盡可能使用最小曝光量并小心漂白(尤其是使用共焦顯微鏡)

二抗錯誤 

- 確保二抗對一抗的培養(yǎng)物種具有特異性

靶細(xì)胞中不存在蛋白質(zhì)

- 檢查文獻(xiàn)以了解細(xì)胞群中是否預(yù)期存在蛋白質(zhì)
- 考慮使用陽性對照

表位因固定而被遮蓋 

- 嘗試不同的固定劑
- 嘗試添加抗原修復(fù)步驟

曝光時(shí)間太短 

- 增加成像時(shí)的曝光時(shí)間和/或增益

高背景非特異性結(jié)合

嘗試在沒有一抗的情況下測試二抗,以確保二抗不會與細(xì)胞內(nèi)的靶標(biāo)結(jié)合

阻擋不良 

- 嘗試更換封閉液
- 嘗試增加封閉孵育時(shí)間

抗體濃度過高

- 嘗試降低一抗?jié)舛?/span>
- 嘗試降低二抗?jié)舛?/span>

反應(yīng)性醛基 

- 考慮在 PBS 孵育步驟中引入 1% NaBH4

光譜重疊 

- 確保二抗的吸收/發(fā)射光譜不重疊

洗滌不足 

- 增加二次孵育后的洗滌步驟

非特異性染色抗體與其他蛋白質(zhì)中存在的表位結(jié)合 

- 嘗試不同的抗體,看看染色模式是否相關(guān)。

抗體濃度過高

- 嘗試降低一抗和二抗?jié)舛?/span>

與內(nèi)源性 IgG 的反應(yīng)性 

- 嘗試使用在細(xì)胞來源以外的物種中產(chǎn)生的抗體(尤其是在原代細(xì)胞培養(yǎng)物中)



掃一掃,關(guān)注微信
地址:上海市嘉定區(qū)安亭鎮(zhèn)新源路155弄16號新源商務(wù)樓718室 傳真:Shanghai Mulong Biotechnology
©2025 上海牧榮生物科技有限公司 版權(quán)所有 All Rights Reserved.  備案號:滬ICP備2022017655號-1
保德县| 石嘴山市| 河曲县| 略阳县| 虞城县| 唐山市| 张北县| 建德市| 昭苏县| 汉中市| 汾阳市| 祁门县| 新和县| 萍乡市| 砀山县| 溧水县| 峨眉山市| 甘孜| 南木林县| 郴州市| 渝中区| 富阳市| 柳林县| 井陉县| 天峻县| 康马县| 德钦县| 新乡市| 偏关县| 梧州市| 洛浦县| 安阳市| 江门市| 繁峙县| 正定县| 邵武市| 肇庆市| 兴文县| 蛟河市| 肥乡县| 永德县|