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哪種類型的抗體適合我?

更新時(shí)間:2024-01-22      點(diǎn)擊次數(shù):369

對(duì)于大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室來(lái)說(shuō),正確的決定取決于科學(xué)和成本的某種結(jié)合。需要考慮的一些問(wèn)題是:

您需要多少材料以及需要多長(zhǎng)時(shí)間?

早期探索型項(xiàng)目可能只需要有限數(shù)量的材料,或者您的工作流程可能一次僅使用幾微克的抗體。利用多克隆生成對(duì)于這些情況非常有效。兔子是多克隆抗體的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),因?yàn)樗哂袕?qiáng)大的免疫系統(tǒng),并且可以根據(jù)需要靈活地一次生產(chǎn)多年的抗體。如果您需要預(yù)先大量的材料而不是長(zhǎng)期使用,那么對(duì)較大的動(dòng)物(例如山羊)進(jìn)行免疫可能會(huì)有所幫助。 

然而,如果您正在嘗試生產(chǎn)用于有可能無(wú)限期使用的檢測(cè)的試劑,那么單克隆生產(chǎn)可能更理想。

抗體的活性是否必須始終相同,或者某些批次間的差異在您的系統(tǒng)中是否可行?

通過(guò)多克隆生產(chǎn),動(dòng)物得到免疫,您的測(cè)試物品就成為最終收集到的一切。隨著時(shí)間的推移,反應(yīng)可能會(huì)發(fā)生變化或成熟,但可以通過(guò)在檢測(cè)中使用一致量的抗體來(lái)減輕這種情況。 

同時(shí),單克隆生產(chǎn)的明確目的是執(zhí)行多個(gè)篩選步驟,以找到表達(dá)適合您的檢測(cè)反應(yīng)的抗體的單個(gè)細(xì)胞系。只要能夠保持穩(wěn)定性,該細(xì)胞系就應(yīng)該能夠在您需要時(shí)表達(dá)抗體。最終一致性的最終保證是對(duì)抗體的可變區(qū)進(jìn)行測(cè)序并將其生產(chǎn)為重組蛋白。 

該項(xiàng)目有時(shí)間限制嗎?

多克隆項(xiàng)目平均需要三個(gè)月的時(shí)間,而分離出具有所需性能的特定單克隆細(xì)胞系可能需要六個(gè)月的時(shí)間。此后生產(chǎn)重組蛋白形式的抗體可能還需要三個(gè)月或更長(zhǎng)時(shí)間。 

您是否已經(jīng)擁有希望與新生成的材料并行使用的現(xiàn)有抗體?

無(wú)論您當(dāng)前擁有的抗體是多克隆還是單克隆,請(qǐng)選擇不同的物種來(lái)開(kāi)發(fā)第二抗體。這樣您就可以用單獨(dú)的二抗進(jìn)行探測(cè)并同時(shí)查看兩種反應(yīng)性。例如,在雞、山羊或豚鼠中制備多克隆是最常選擇與現(xiàn)有兔抗體并行使用的選項(xiàng)。 

您的預(yù)算是多少?

由于固有的成本效益(平均單克隆成本約為平均多克隆成本的六倍),同時(shí)多種抗體的高通量需求很可能會(huì)利用多克隆生產(chǎn)。然而,對(duì)于早期診斷或治療,以單克隆項(xiàng)目開(kāi)始可能會(huì)更好地滿足您的整體需求,并在項(xiàng)目加速方面帶來(lái)紅利。


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