RNA 測序 (RNA-seq) 是一項革命性技術(shù),改變了基因組學領(lǐng)域。它為研究人員揭示細胞和分子水平上發(fā)生的許多復雜過程開辟了新途徑。與 DNA 測序不同,RNA-seq 通過提供任何給定時間所有活性基因的快照來深入了解基因組的功能元件。那么,這如何幫助用戶對不同的細胞類型進行分類呢?請繼續(xù)閱讀以了解更多信息。
RNA 測序已成為細胞類型分類的強大工具。它使科學家能夠識別特定的細胞類型并了解它們在各種生物過程中的作用。這是因為 RNA-seq 能夠分析單個細胞中的基因表達水平。許多研究領(lǐng)域都將從這種開創(chuàng)性的方法中受益,但它在研究肺纖維化等疾病方面已經(jīng)顯示出非凡的潛力,在這些疾病中,不同細胞群的作用尚未全了解。
單細胞 RNA 測序 (scRNA-seq) 將 RNA 測序提升到一個新水平。它使科學家能夠分析單個細胞的轉(zhuǎn)錄組,提供細胞類型和狀態(tài)的高分辨率視圖。與傳統(tǒng)的 RNA 測序方法相比,這是一個重大進步,傳統(tǒng)的 RNA 測序方法提供大量細胞的平均基因表達譜。
在最近一項題為“單細胞 RNA 測序揭示肺纖維化中不同上皮和間質(zhì)譜系的促纖維化作用"的研究中,scRNA-seq 被用來揭示肺纖維化的復雜細胞景觀。該研究使用 10x Genomics Chromium 平臺進行單細胞 RNA 測序,該平臺生成乳液中的單細胞凝膠珠 (GEM),用于逆轉(zhuǎn)錄過程以創(chuàng)建 cDNA。然后對該 cDNA 進行擴增并用于測序。
DeNovix DS-11 FX+ 分光光度計/熒光計在這項研究中發(fā)揮了至關(guān)重要的作用。該儀器用于定量 RNA,這是 RNA 測序過程中的關(guān)鍵步驟。RNA的定量確保了測序過程有足夠的材料,并有助于保證樣品的質(zhì)量。這是 10x Genomics 平臺單細胞 RNA 測序的準備步驟。
細胞計數(shù)是 RNA 測序的另一個重要準備步驟。在一項相關(guān)研究“模擬人類肺細胞暴露于野火中發(fā)現(xiàn)異常的 lncRNA 特征"中,DeNovix CellDrop™ 系統(tǒng)用于在 0.4% 臺盼藍 1:1 稀釋液中對人類永生化支氣管氣管細胞 (AALE) 進行計數(shù),并在其死亡前 24 小時進行計數(shù)。直接煙霧暴露(DSE)。暴露于氣液界面 (ALI) 室后,細胞用于 RNA 測序分析,以識別 IncRNA 的變化。結(jié)果表明煙霧成分對于野火煙霧的分子效應的重要性。具體來說:
“我們的結(jié)果闡明了化學成分(以及地理來源)在評估野火煙霧暴露可能導致的呼吸系統(tǒng)健康風險方面的重要性。我們使用通過實驗生成的 RNA-seq 數(shù)據(jù)進行公正的分析,旨在識別差異表達的轉(zhuǎn)錄本,在這里,通過嚴格和全局的分析,我們證明不同的野火煙霧會誘導 lncRNA 的異常表達。"
機器學習是另一種越來越多地與 RNA 測序結(jié)合使用的工具。通過訓練已知細胞類型的數(shù)據(jù),機器學習算法可以根據(jù)細胞類型的基因表達譜對細胞類型進行分類。這可以大大提高細胞類型分類的準確性和效率。
RNA-seq 的應用廣泛且多樣。從了解疾病中細胞群的復雜性到發(fā)現(xiàn)選擇性剪接變體,RNA-seq 是現(xiàn)代基因組學庫中的多功能工具。
隨著新技術(shù)和方法的不斷開發(fā),RNA測序的未來是光明的。對不同 RNA 分子及其表達水平的研究不斷增長,這將與 RNA-seq 的進步契合,并擴大我們可以理解的細胞類型的數(shù)量。
在 DeNovix,我們很自豪能夠成為這個令人興奮的領(lǐng)域的一部分。我們邀請您探索我們的產(chǎn)品和服務范圍,并與我們一起突破 RNA 測序的可能界限。使用我們的組合分光光度計/熒光計和開創(chuàng)性的自動細胞計數(shù)器,用戶可以優(yōu)化 RNA 測序的準備步驟,以保證最高的質(zhì)量。我們可以一起繼續(xù)解開細胞的秘密,并在分子水平上增進我們對生命的理解。