熒光染料是指吸收一定波長的光波并發(fā)射大于光吸收的另一波長的光波的物質(zhì)。它們大多是含有苯環(huán)或雜環(huán)并具有共軛雙鍵的化合物。熒光染料可以單獨(dú)使用,也可以組合成復(fù)合熒光染料。
熒光染料常用于制備熒光染料產(chǎn)品,以及增白洗滌劑中的增白劑、用于指示信號(hào)的各種道路標(biāo)線涂料、熒光標(biāo)記服裝等。
熒光染料的其他用途包括泄漏污水系統(tǒng)、水和工業(yè)污染物、連接系統(tǒng)、測(cè)量發(fā)電廠排放的液體、廁所泄漏、監(jiān)控非法下水道連接、研究流量和繪制地圖。此外,還用于紡織印染、一些特殊標(biāo)志和軍事跟蹤等。
由于其靈敏度高、操作方便,已逐漸取代放射性同位素作為檢測(cè)標(biāo)記,廣泛應(yīng)用于熒光免疫、熒光探針、細(xì)胞染色等領(lǐng)域。包括特異性DNA染色、染色體分析、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡等相關(guān)檢測(cè)研究。此外,許多核酸染料在多色染色系統(tǒng)中是非常有用的染色劑。
熒光標(biāo)記單克隆抗體技術(shù)拓展了流式細(xì)胞術(shù)在細(xì)胞膜及細(xì)胞內(nèi)各種功能抗原、腫瘤基因蛋白等領(lǐng)域研究的無限應(yīng)用空間。熒光探針可以通過蛋白質(zhì)交聯(lián)劑與單克隆抗體共價(jià)結(jié)合。免疫熒光標(biāo)記常用的染料有異硫氰酸熒光素、FITC、藻紅蛋白等。
核酸熒光染料對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行染色,定量測(cè)量細(xì)胞發(fā)出的熒光強(qiáng)度,從而測(cè)定細(xì)胞核中DNA和RNA的含量,可以分析細(xì)胞周期和細(xì)胞生長情況。有很多種熒光染料可以對(duì)細(xì)胞中的 DNA 或 RNA 進(jìn)行染色。常用的DNA染料包括PI、DAPI和Hoechst 33342; RNA染料包括噻唑橙和吖啶橙。
熒光染料是細(xì)胞生物學(xué)等科學(xué)研究中重要工具,而濾光立方體是熒光顯微鏡中的重要組成部分。那么一般熒光染料的亮度對(duì)比如何呢?
熒光染料的亮度可以用來比較不同熒光染料的熒光標(biāo)記效果,用陰性和陽性細(xì)胞群的熒光信號(hào)之間的關(guān)系來表示。但陰性細(xì)胞群的熒光信號(hào)與儀器的信號(hào)強(qiáng)度、自發(fā)熒光、非特異性染色、電子噪聲等多種因素有關(guān)。
熒光染料染色指數(shù)為陽性細(xì)胞群平均熒光強(qiáng)度與陰性細(xì)胞群平均熒光強(qiáng)度之差與陰性細(xì)胞群熒光強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)差之比的一半。熒光染料染色系數(shù)僅與抗體克隆和質(zhì)量有關(guān),熒光團(tuán)的純度與質(zhì)量、熒光修飾比例、激光線及其功率、長通和帶通濾光片、靶細(xì)胞等因素有關(guān).(您可能想購買熒光染料并獲取熒光團(tuán)列表)
熒光染料的染色指數(shù)與熒光染料的亮度呈正相關(guān),即染料的亮度越高,染色系數(shù)越高。